В период 2004- 2008г (МКС-9 – МКС-17) проведены 6 сеансов эксперимента КЭ «Вакцина-К».
Реализация каждого сеанса КЭ по кристаллизации осуществляется в несколько этапов:
- предполетная подготовка биокристаллизатора (регламентные работы);
- предполетная подготовка препаратов (белки и наборов реактивов);
- подбор условий кристаллизации с использованием стандартных наборов реактивов;
- подбор условий кристаллизации в рабочей аппаратуре;
- заправка биокристаллизационных кассет; проведение сеанса эксперимента на орбите; предварительная оценка качества выросших кристаллов и отбор качественных кристаллов для дальнейшей работы.
Подбор условий кристаллизации в КЭ «Вакцина-К» проводился в соответствии со стандартными методиками, а также методиками, разработанными в ИБХ РАН.
Источником получения рекомбинантного белка TBI являлся штамм E.coli JM103, несущий плазмиду рTBI с синтетическим геном, кодирующим белок TBI. Степень очистки препарата, используемого для кристаллизации составил около 95 % (данные SDS-электрофореза).
В результате проведения сеансов КЭ «Вакцина-К» в большинстве случаев было выявлено наличие кристаллов стержнеобразной, трубчатой формы или без определенной огранки с максимальным размером около 200 мкм при наличии аморфного осадка (рис. 2). Однако, несмотря на то, что полученные кристаллы в 1,5-2 раза превосходили аналогичные кристаллы, выращенные в контрольных наземных экспериментах, размер их не позволил провести рентгеноструктурные исследования как с использованием источника излучения ИБХ РАН (рис. 3), так и использованного типа синхротрона.
Обычное освещение
|
Поляризованный свет
|
Результаты КЭ в период МКС-9. Микровидеоизображения содержимого кристаллизационных ячеек с белком TBI (УБК № 5, кам. 4). Противораствор- 10% ПЭГ 8000 и 65 мМ (NH4)2SO4 в 35 мМ Na-какодилатном буфере. Размеры наибольших кристаллов составляют 90 х 30 х 20 мкм.
Результаты КЭ в период МКС-9. Микровидеоизображения содержимого кристаллизационных ячеек с белком TBI (УБК № 8, кам. 4). Противораствор- 9% хлорид натрия. Размеры наибольших кристаллов составляют 100 х 30 х 20 мкм.
Результаты контрольного наземного эксперимента в период МКС-9. Микровидеоизображения содержимого кристаллизационных ячеек с белком TBI (УБК № 15, кам. 1). Противораствор- 9% хлорид натрия Размеры наибольших кристаллов не превышают 30 мкм.
Рисунок 2 – Результаты КЭ «Вакцина-К» в период МКС-9.
Проведенные предварительные рентгеноструктурные исследования наиболее крупных кристаллов белка TBI («Вакцина-К») показали их непригодность для получения набора дифракционных данных.

Рисунок 3 - Микровидеоизображение рентгеновского капилляра с вмонтированным в него кристаллом.
В результате выполнения эксперимента «Вакцина-К» не удалось получить кристаллов белка с достоверно определяемыми гранями ни в КЭ, ни в контрольном наземном эксперименте, на основании чего было принято решение о завершении космического эксперимента «Вакцина-К».